在優(yōu)化茶樹葉綠素酶提取及活性分析條件的基礎上,對茶樹葉綠素酶的分離純化及其性質(zhì)進行了研究,結果表明:加入與鮮葉等量PVP,用pH7.5的磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液提取的葉綠素酶活性最高,葉綠素酶的活性分析最佳條件為在45℃條件下反應15min;經(jīng)過分離純化后,葉綠素酶的純度提高了55.96倍,酶的得率為9.45%,SDS-PAGE結果顯示有一條蛋白質(zhì)的條帶,酶的亞基分子量為37.2kD;對純化后的葉綠素酶的性質(zhì)研究表明,該酶最適pH為7.5,45℃時候反應活性最高,在4℃保存條件下,隨著存放時間的延長,酶活性逐漸下降,保存一個月后葉綠素酶活性剩余45%,用2mmol/L和7mmol/L的金屬離子(Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe3+)、EDTA處理,都對葉綠素酶活性有不同程度的促進作用。
完成機構:華中農(nóng)業(yè)大學園藝林學學院茶學專業(yè),湖北武漢430070