為了在茶樹中開發(fā)EST-SSRs功能性標記,利用生物信息學方法對NCBI網上公開的3288奈茶樹(Camellia subebsus)ESTs序列進行EST-SSRs特征分析。剔除冗余序列,得到非冗余序列2083條。在非冗余序列中發(fā)現(xiàn)含不同重復基元SSRs的EST序列有385條,共486個EST-SSRs,平均相隔2.10kb出現(xiàn)1個SSR。在2~6bp的重復基元中,二核苷酸重復基元的SSRs出現(xiàn)頻率最高(51.97%),其次是三核苷酸(19.55%)。對所有的重復基元類型進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),所占比例最高的是AG/CT(47.74%),其次分別是AT/TA(4.73%)和AAG/CTT(4.73%)。利用Prime5軟件,設計了206對EST-SSRs引物,隨機選用72對引物進行SSR擴增,發(fā)現(xiàn)31對引物可以擴增出條帶,其中29對引物具有多態(tài)性,多態(tài)性比率為93.5%。這些EST-SSRs將有助于茶樹基因組學方面的研究。
完成機構:[1]中國農業(yè)科學院茶葉研究所/國家茶樹改良中心,杭州310008 [2]南京農業(yè)大學,南京210095