利用離子交換層析和凝膠過濾層析等方法,從日本好(Charybdis japonica)血淋巴中分離純化出了酚氧化酶,并以L-二羥苯丙氨酸(L—DOPA)作為特異性底物對其生化性質(zhì)和酶性質(zhì)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,酚氧化酶和酚氧化酶原的分子質(zhì)量分別為64.5ku和69.5ku。以L—DOPA為底物對酚氧化酶純品進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),其最適pH值為6.0、最適溫度為40℃。對底物L(fēng)—DOPA和兒茶酚的米氏常數(shù)Km值分別為3.41和7.97mmol/L。該酶對亞硫酸鈉、苯硫脲極為敏感,對硫脲、苯甲酸非常敏感,表明該酶很可能是一種兒茶酚酶型的酶。此外,EDTA,DETC,Zn^2+,Mg^2+和Cu^2+均能顯著抑制該酶活性,且10mmol/L Cu^2+能有效地回復(fù)該酶被DETC所抑制的酶活性,表明該酶確為一種Cu-金屬酶。
完成機(jī)構(gòu):中國海洋大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)部海洋生物系,山東青島266003