為建立油茶Camellia oleifera根腐病菌層生鐮刀菌Fusarium proliferatum的巢式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)快速檢測體系.?dāng)U增層生鐮刀菌核糖體DNA基因間隔序列(ITS)區(qū)并測定其序列,比較該序列與GenBank中近似種的ITS序列差異.設(shè)計了特異性引物GF1和GR2,利用該對引物與ITS1和ITS4進行巢式PCR擴增檢測層生鐮刀菌。結(jié)果顯示,巢式PCR對層生鐮刀菌的檢測靈敏度可達100ag基因組DNA,比常規(guī)擴增方法提高了1萬倍。利用設(shè)計的GF1/GR2特異性引物與ITS區(qū)通用引物進行巢式PCR擴增.可靈敏地擴增出油茶根腐病菌層生鐮刀菌DNA。
完成機構(gòu):中南林業(yè)科技大學(xué)林學(xué)院,湖南長沙410004