構(gòu)建了一個高效表達(dá)大腸桿菌來源的GGT重組質(zhì)粒pET28a-GGT并轉(zhuǎn)化E.coliBL21(DE3),工程菌株經(jīng)0.2mmol/LIPTG,20℃誘導(dǎo)表達(dá)8h,粗酶液的酶活達(dá)到1.5U/mL,大約是出發(fā)菌株E.coliK-12的26倍。工程菌粗酶液以267mmol/LL-谷氨酰胺和2.0mol/L乙胺作底物,37℃、pH10.0條件下反應(yīng)4h,L-茶氨酸的生成量達(dá)到26.9g/L,L-谷氨酰胺的轉(zhuǎn)化率為57.8%。
完成機構(gòu):南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江蘇南京210097